อิทธิพลของสภาพวัฒนธรรมต่อการเจริญเติบโตของ Escherichia coli

การใช้ e. coli ในการผลิตยาเป็นวิธีการทางชีวภาพ นั่นคือการใช้เทคโนโลยีชีวกรรมชีวภาพเพื่อถ่ายโอนยีนต่างประเทศไปยัง e. coli การหมักและวัฒนธรรมสำหรับการแสดงออกการหมุนเหวี่ยงเพื่อรวบรวมแบคทีเรียแล้วใช้สารละลายเฉพาะเพื่อทำลายแบคทีเรียและรวบรวมพวกเขา โปรตีนเป้าหมายจะทำเป็นยาหลังจากการประมวลผลที่ตามมา

1.อุณหภูมิวัฒนธรรม

การทดลองแสดงให้เห็นว่าอุณหภูมิวัฒนธรรมที่เหมาะสมอยู่ในช่วง35 ~ 40 ℃ และความหนาแน่นของเซลล์เพิ่มขึ้นตามการเพิ่มขึ้นของอุณหภูมิซึ่งสอดคล้องกับลักษณะการเจริญเติบโตทั่วไปของ e. coli. อย่างไรก็ตามอัตราการเติบโตจะเร็วขึ้นที่37 ℃ ~ 38 ℃ และการเจริญเติบโตที่ตามมาค่อนข้างแบน การรวมลักษณะวัฒนธรรมทั่วไปของ e. coli และอิทธิพลข้ามอุณหภูมิและปัจจัยที่มีอิทธิพลอื่นๆอุณหภูมิวัฒนธรรมถูกตั้งค่าไว้ที่37.5 °C ในการทดลอง

2.ค่า ph

หลังจาก culturing e. coli สำหรับ18h ที่มีค่า ph ต่างกันผลการทดสอบแสดงให้เห็นว่าค่า ph 8.0ไม่มีผลต่อความหนาแน่นของเซลล์และค่า ph ต่ำเกินไปหรือสูงเกินไปเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ดี เมื่อค่า ph คือ7.5ความหนาแน่นของเซลล์ค่อนข้างสูงสุดและ OD600nm ถึง3.25

3.อิทธิพลของออกซิเจนละลายน้ำต่อการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย

ตามดัชนีออกซิเจนละลายน้ำที่แตกต่างกันใน fermentor ความหนาแน่นของเซลล์ของระบบการหมักเมื่อได้รับการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา18ชั่วโมง ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าความหนาแน่นของเซลล์เพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่องโดยเพิ่มขึ้นของดัชนีออกซิเจนที่ละลายน้ำแต่ความหนาแน่นของเซลล์เพิ่มขึ้นอย่างช้าๆหลังจาก50%

4.อิทธิพลของจำนวน inoculation

การเพิ่มประสิทธิภาพปริมาณการฉีดวัคซีนที่แตกต่างกันอาจมีผลกระทบมากขึ้นต่อการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย ที่3% ถึง4% สถานะการเจริญเติบโตของแบคทีเรียจะดีกว่าปริมาณการฉีดวัคซีนต่ำหรือสูงเกินไป ปริมาณการฉีดวัคซีนต่ำเกินไปจะทำให้การเจริญเติบโตของแบคทีเรียช้าเกินไป ปริมาณ inoculum สูงเกินไปจะใช้สารอาหารจำนวนมากในระยะแรกและทำให้เกิดการสูญเสียสายพันธุ์ของเมล็ดดังนั้นจึงใช้ปริมาณ inoculum 4% ในการทดลอง

5.การกำหนดเวลาวัฒนธรรม

ผลการทดลองของเวลาฟักไข่ที่แตกต่างกันแสดงให้เห็นว่าแบคทีเรียเพิ่มขึ้นเป็นทวีคูณจาก12ถึง18ชั่วโมงแล้วเติบโตช้า มันแสดงให้เห็นว่าในขั้นตอนต่อมาของการเจริญเติบโตแบบทวีคูณพลังงานของแบคทีเรียไม่เหมาะสำหรับการสืบพันธุ์ของมวลแต่ได้รับผลกระทบจากการเผาผลาญ ดังนั้นเพื่อลดวงจรการเจริญเติบโตการเก็บเกี่ยวของแบคทีเรียควรอยู่ในช่วงเริ่มต้นของการเจริญเติบโตนั่นคือ18h.

6.การกำหนดความเร็ว

ความเร็วของตู้อบสั่นเพิ่มขึ้นด้วยการเพิ่มขึ้นของออกซิเจนละลายน้ำและความหนาแน่นของเซลล์เพิ่มขึ้นตามนั้น อัตราการเติบโตของความหนาแน่นของเซลล์เร็วขึ้นที่100 ~ 200r/นาทีและค่อนข้างช้าที่200 ~ 300r/นาทีแสดงให้เห็นว่าความเร็วของ200r/นาทีสามารถส่งเสริมการสลายตัวของออกซิเจนในอากาศได้แล้ว โดยคำนึงถึงการเพิ่มขึ้นของความเร็วอาจก่อให้เกิดผลเสียเช่นโฟมดังนั้นความเร็วที่ดีที่สุดที่นำมาใช้ในการทดสอบคือ200r/นาที

* ข้างต้นเป็นการแบ่งปันบทความทางวิชาการ หากคุณต้องการรายละเอียดเพิ่มเติมโปรดคลิกที่ชื่อ